湿度是影响活细胞成像实验结果质量和可靠性的关键因素。在成像环境中保持湿度水平对于确保细胞活力、防止脱水引起的伪影以及促进动态细胞过程的准确观察至关重要;准确控制湿度不仅可以维持细胞生存所需的生理条件,还有助于很大限度地减少实验的可变性,提高研究结果的可重复性,减轻湿度对细胞的影响。 湿度对细胞的影响: 1、细胞行为 湿度水平的变化会影响细胞形态、运动性,甚至基因表达。细胞被浸没在舒适的培养基层中,对周围的渗透条件高度敏感。当湿度不足时,水会从细胞培养基或缓冲液中蒸发,导致溶质浓度增加和渗透压降低。这引发了渗透效应的连锁反应,导致离子浓度发生变化。这种变异会破坏许多细胞的进程,包括跨细胞膜运输、蛋白质折叠和基因表达。 2、数据再现性 在科学研究中,再现性至关重要。实验之间湿度条件不一致可能会给结果带来不必要的变化。这就像想要烤出一个完整的蛋糕,却用了一个有问题的烤箱。通过控制湿度,您将增加获得一致且可重复数据的机会,这使你更容易从实验中得出有意义的结论。 3、光学失真 湿度会影响活细胞图像的光学质量。低湿度会引发细胞培养基内离子浓度的变化,导致培养基折射率的波动,并产生光学畸变。图像可能会像美术馆里的一幅超现实的抽象画——都是波浪形。另一方面,高湿度会导致冷凝,从而产生水滴,阻碍光路并影响成像质量。 4、蒸发 细胞非常敏感,即使是微小的环境变化也会使它们失去平衡。当湿度较低时,就会出现问题。任何湿度的降低都会引发细胞培养基中的水分蒸发,留下过量的盐和矿物质。然后,这种有毒物质的积累会对细胞构成威胁,往往导致细胞死亡。 5、气体交换 湿度不仅影响水分含量,在气体交换中也起着至关重要的作用。它对包括氧气在内的气体在生长培养基中的溶解方式有直接影响。当湿度水平波动时,由于其与压力的内在联系,它可能会破坏气体的溶解度。在湿度不足的情况下,气体交换可能会受到影响而导致细胞培养物内缺氧。通过确保稳定的湿度水平,将为细胞提供舒适呼吸的能力,而无需微型氧气罐! 总的来说,湿度不仅仅是活细胞成像中需要考虑的随机因素,它也是一个可以显着影响实验结果的关键参数。保持适当的湿度水平将确保您的细胞保持健康、自然运行,并产生可靠且可重复的数据。为了实现准确的湿度控制,需要采用湿度管理解决方案。 成功进行活细胞成像的湿度解决方案 1、使用恒温恒湿箱 当谈到为活细胞成像实验保持理想的湿度水平时,用湿度室或显微镜用活细胞培养系统可以实现。这些专用设备可准确控制湿度和温度,确保细胞有宾至如归的感觉。 在这类设备中,ibidi Stage Top活细胞工作站确实脱颖而出。它可无缝连接到几乎所有标准倒置显微镜,这使其成为一种通用的选择。由于ibidi的技术可以保持湿度,细胞不会受到长期检测中可能出现的常见不良影响。它们也是高分辨率显微镜的理想选择,因为它们提供了聚焦稳定性,并确保加热的盖子上不会出现令人讨厌的冷凝。 ibidi Stage Top Incubator 2、密封严密 为了保持适当的湿度水平,需要对培养皿和培养室进行紧密密封,以防止水分流失。可以使用ibidi的ibiSeal轻松实现这一目标,ibiSeal是一种自粘式覆盖膜,专为密封细胞培养和显微镜应用中的开放孔和储液池而设计。此外,ibidi µ-Dishes 独特的设计是带锁的盖子。当盖子处于lock位置,很大程度减小蒸发的影响,从而能进一步加强湿度控制。 ibiSeal 3、封口膜 将小片封口膜放在细胞培养容器的储液池/孔上可以解决蒸发带来的影响。 4、定期监测 在实验过程中持续监测湿度水平。设置湿度计来密切关注环境。值得注意的是,此功能是ibidi Stage Top Systems的内置功能。 总结:在细胞成像条件下保持细胞湿度! |