摘要:全自动样品组织研磨仪对水稻叶片的研磨实验主要目的便是为了满足分子标记辅助育种中基因型鉴定、基因克隆、测序的需要,而此次实验借用棉签等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2种样品DNA提取液中进行操作,建立了一种简单、快速、环保的水稻叶片DNA提取方法。实验结果表明,提取溶液通过PCR扩增,可满足基因扩增对模板的要求。 同时,对其进行了灵敏度测试,稀释107倍仍然能够扩增出目标片段;然后再通过PCR、克隆载体连接等分子生物学手段,验证此方法也满足测序的需要。本方法能够在90s内完成植物叶片DNA的提取,解决了目前植物基因组DNA提取方法需要离心机等昂贵特殊设备、提取步骤繁锁、提取过程中刺激味大、提取时间长等问题,有利于大规模开展分子标记辅助育种中材料基因型的鉴定,具有简单、快速、廉价、环保等优点。 实验目的:拟测试全自动样品组织研磨仪对水稻叶片研磨效果 1.测试对象:上海净信全自动样品快速研磨机,型号为JXFSTPRP-24L 2.工作原理:样品(水稻叶片)放入离心管中,放入磨球,通过研磨设备的高速上下振荡带动球磨珠进行粉碎样品。 水稻叶片样品前处理研磨实验步骤: 1、需要提前备好净信组织研磨仪主机,水稻叶片若干,离心管和不锈钢球磨珠几颗,提取试剂 2、需要把样品水稻叶片用剪刀剪切成小块状,然后放入样品离心管内,再加入适量的氧化锆珠和相应提取试剂在离心管内 3、把离心管放入机器适配器中,但要注意适配器的配平紧固,然后再锁盖 4、根据样品水稻叶片的实验需求去设置仪器设备的研磨频率及时间 5、启动设备,开启样品的程序运转,待程序停止运转,便可获得完成磨碎后的样品 水稻叶片样品前处理研磨实验效果:
实验注意:在应用全自动组织研磨仪对水稻叶片开展前处理实验研磨时,要尽可能的去添加一些提取试剂,让样品可以在前处理过程中因有液体的情况下可使样品的研磨效果更加充分。 |