目前科研人的WB现状就是干货都懂,实验状况却频出。辛辛苦苦花时间制备的细胞却遇到提取液检测不到目的蛋白、目的蛋白信号弱 、转膜效率低 、显色或曝光后无条带 、Western blot背景高且不均匀、非特异性条带、条带拖尾或变形等常见的问题。众所周知,有效的样品制备是影响 WB 实验可重复性的重要因素。 近日,贵州医科大学某实验室就使用上海净信冷冻研磨仪制备了人体胃癌细胞样品提取蛋白做WB实验。实验结果非常成功,研磨效果也令老师非常满意,对后续的实验分析很有帮助。 实验样品:人体胃癌细胞; 实验器材:冷冻研磨仪JXFSTPRP-CLN、研磨管、氧化锆珠若干; 实验步骤: 1.细胞沉淀,加缓冲液,提取液,离心重悬; 2.加入氧化锆珠,与细胞沉淀物的比例1:1; 3.设置研磨参数,启动。 实验效果图: 研磨前(未加研磨珠-加研磨珠-研磨后) 附:实验仪器图片净信冷冻研磨仪JXFSTPRP-CLN 上海净信JXFSTPRP-CLN冷冻研磨仪是一种快速、高效、制冷的研磨系统。它能在非常短的时间内将土壤、植物和动物的组织/器官、细菌、酵母、真菌、孢子、古生物标本等样品完成研磨、粉碎、混合机细胞破壁。广泛应用于生命科学、医药、生化、环境、地质、农业、林业、质检、材料等领域。 |