猴源性成份鉴定荧光PCR检测试剂盒采用荧光PCR技术,通过荧光信号的变化检测猴线粒体16S基因的特异性序列。该试剂盒适用于鉴定多种样本(如猴组织、猴血液、生物试剂、生物材料、生物制品和化妆品等)中是否含有猴源性基因成份。
储存条件及有效期:
试剂盒置于-20℃冰箱中冻存,试剂盒有效期为一年。
试剂盒使用方法:
1)从试剂盒中取出水、PCR反应液、P溶液、阳性和阴性核酸对照,室温融化,置冰箱4℃待用。
2)取待检样本(50-100μL)用柱法或磁珠法提取DNA,并溶于50μL水中。
3)反应体系配制:试剂使用前,振荡混匀,3000rpm离心2秒。
在0.2mL平盖PCR薄壁管或平盖PCR八联管中,按上述加样量配制反应体系液(阳性和阴性对照管同样配制,待检DNA溶液换为试剂盒提供的阳性核酸对照和阴性核酸对照,加样量分别为3 μL),盖好管盖,去除管中气泡,并用离心机甩离,确保所有液体都在管底。将PCR 管放入荧光PCR检测仪中。
4)荧光PCR检测仪循环条件设定
质控标准:
阴性对照的CT值应等于None;同时阳性对照的CT值应小于30。
否则,此次试验视为无效。(CT值应以S型曲线拐点的循环数为准)
结果判定:
1)CT值为None的样本判定为阴性;CT值小于等于38的样本判定为阳性。
2)CT值大于38的样本建议重做。重做后CT值为None判定为阴性,否则判定为阳性。
3)对于某些未呈现S型曲线,但本底较高的样本,应判定为阴性。